Гомогенизация (биология) - Homogenization (biology)

В гистопатология, патологическая гомогенизация рассматривается как потеря вариаций, например коллаген в склеротический лишай (на фото).

Гомогенизация, в клеточная биология или молекулярная биология, представляет собой процесс, при котором различные фракции биологического образца становятся равными по составу. Это может быть признаком болезни гистопатология, или преднамеренный процесс исследования: гомогенизированный образец имеет одинаковый состав во всем, так что удаление фракции не изменяет общий молекулярный состав оставшегося образца и идентично удаленной фракции. За индуцированной гомогенизацией в биологии часто следует молекулярная экстракция и различные аналитические методы, в том числе ELISA и вестерн-блоттинг.[1]

Методы

Гомогенизацию ткани в растворе часто проводят одновременно с клеточным лизис. Однако для предотвращения лизиса ткань (или скопление клеток, например, из культура клеток ) можно хранить при температуре чуть выше нуля, чтобы предотвратить автолиз, а в изотонический решение для предотвращения осмотический повреждение.[2]

Если возможно замораживание ткани, криогомогенизация может выполняться в «сухих» условиях и часто является методом выбора, когда желательно собрать несколько различных молекулярных классов (например, оба белок и РНК ) из одного образца или комбинированного набора образцов, или когда желательно длительное хранение части образца. Криогомогенизацию можно проводить с использованием переохлажденной ступки и пестика (классический подход) или гомогенизировать ткань, измельчая ее в мелкий порошок в чистом пластиковом пакете, опирающемся на переохлажденный твердый металлический блок.[3] (недавно разработанная и более эффективная методика).

Гомогенизация под высоким давлением используется для изоляции содержимого Грамположительные бактерии, так как эти клетки исключительно устойчивы к лизису, и их можно сочетать с высокотемпературной стерилизацией.[4]

Гомогенизация Даунса является методом, подходящим для мягких тканей млекопитающих, в то время как лизис клеток млекопитающих также был продемонстрирован с помощью центрифугирования.[5]

использованная литература

  1. ^ Шмидт С.Д., Никсон Р.А., Мэтьюз П.М. (2012). «Обработка тканей перед анализом белков и метаболитов, связанных с болезнью Альцгеймера, включая Aβ». Методы Мол. Биол. Методы молекулярной биологии. 849: 493–506. Дои:10.1007/978-1-61779-551-0_33. ISBN  978-1-61779-550-3. PMID  22528111.
  2. ^ Чанг, Та-Юань; Лиманек, Джеймс С .; Чанг, Кэтрин C.Y. (1 сентября 1981 г.). «Простая и эффективная процедура для быстрой гомогенизации культивируемых клеток животных, выращенных в монослое». Аналитическая биохимия. 116 (2): 298–302. Дои:10.1016/0003-2697(81)90360-2.
  3. ^ фон Циглер, Лукас М .; Saab, Bechara J .; Мансуй, Изабель М. (27 марта 2013 г.). «Простой и быстрый метод криогомогенизации тканей, позволяющий извлекать самые разные молекулы». Журнал методов неврологии. 216 (2): 137–41. Дои:10.1016 / j.jneumeth.2013.03.005. PMID  23541735.
  4. ^ Wuytack, Elke Y; Дилс, Энн М.Дж .; Михилс, Крис В. (1 августа 2002 г.). «Бактериальная инактивация путем гомогенизации под высоким давлением и высоким гидростатическим давлением». Международный журнал пищевой микробиологии. 77 (3): 205–212. Дои:10.1016 / S0168-1605 (02) 00054-5.
  5. ^ Сингх, Каустуб; Гупта, Анкур; Бюхнер, Абель Джон; Ибис, Фатьма; Пронк, Иоахим В .; Тэм, Дэниел; Эрал, Хусейн Бурак (1 июля 2019 г.). «Анализ центробежной гомогенизации и ее применения для эмульгирования и механического лизиса клеток». Журнал коллоидной и интерфейсной науки. 547: 127–135. Дои:10.1016 / j.jcis.2019.03.036.