Перенос хромосом, опосредованный микроклетками - Википедия - Microcell-mediated chromosome transfer

Перенос хромосом, опосредованный микроэлементами (или MMCT) это техника, используемая в клеточная биология и генетика передать хромосома от определенного донора клеточная линия в линию клеток-реципиентов. MMCT используется с 1970-х годов и внесла свой вклад во множество открытий, включая опухоль, метастаз и теломераза гены-супрессоры а также информацию о эпигенетика, x-инактивация, митохондриальная функция и анеуплоидия.[1][2] MMCT следует основной процедуре, при которой клетки-доноры (т.е. клетки, обеспечивающие одну или несколько хромосом или фрагментов для клетки-реципиента) индуцируются к многоядерный их хромосомы. Эти ядра затем проталкиваются через клеточная мембрана создавать микроэлементы, которые могут быть слиты с линией клеток-реципиентов.[1]

История

Термин MMCT впервые был использован Фурнье и Раддлом в 1977 году.[3] Их метод был основан на предыдущей работе 1974 года Эге, Рингерца, Веометта и его коллег.[4][5] синтез методов, используемых в то время для индукции многоядерности в клетках, удаления ядер и слияния клеток. Следующий важный шаг в MMCT произошел в 1980-х, когда новые трансфекция методы были использованы для введения выбираемые маркеры на хромосомы, что позволяет выбирать для введения определенные хромосомы и легче создавать определенные гибриды.[1]

Процедура

Процедуры MMCT немного отличаются, но все они требуют: индукции многоядерности, энуклеация (удаление ядер), и слияние. Многоядерность обычно достигается за счет длительной остановки митоза путем колцемид лечение. Определенные клетки затем «выскользнут» из митоз и образуют несколько ядер. Затем эти ядра можно удалить с помощью цитохалазин B нарушить цитоскелет и центрифугирование в градиент плотности для принудительной энуклеации. Затем вновь созданные микроэлементы могут быть слиты с клетками-реципиентами (мишенями) путем воздействия полиэтиленгликоля, использования вируса Сендай или электрослияния.[1][6]

Варианты теперь позволяют создавать "гуманизированных" мышей с большими частями хромосом человека.[7] а также новые методы для искусственных хромосом человека и мыши.[8]

Рекомендации

  1. ^ а б c d Доэрти AM, Фишер EM (сентябрь 2003 г.). «Микроэлементный перенос хромосом (MMCT): маленькие клетки с огромным потенциалом». Геном мамм. 14 (9): 583–92. Дои:10.1007 / s00335-003-4002-0.
  2. ^ Sengupta K .; и другие. (Февраль 2007 г.). «Искусственно введенные анеуплоидные хромосомы занимают консервативное положение в клетках рака толстой кишки». PLOS ONE. 2 (2): e199. Дои:10.1371 / journal.pone.0000199. ЧВК  1805818. PMID  17332847.
  3. ^ Fournier RE, Ruddle FH (январь 1977 г.). «Опосредованный микроклетками перенос хромосом мышей в соматические клетки мышей, китайского хомячка и человека». Proc Natl Acad Sci USA. 74 (1): 319–23. Дои:10.1073 / пнас.74.1.319. ЧВК  393251. PMID  264685.
  4. ^ Эге Т., Рингертц Н.Р. (август 1974 г.). «Получение микроэлементов путем энуклеации микроядерных клеток». Exp. Cell Res. 87 (2): 378–82. Дои:10.1016/0014-4827(74)90494-7. PMID  4370277.
  5. ^ Веометт Г., Прескотт Д.М., Шей Дж., Портер К.Р. (май 1974 г.). «Реконструкция клеток млекопитающих из ядерных и цитоплазматических компонентов, разделенных обработкой цитохалазином B». Proc Natl Acad Sci USA. 71 (5): 1999–2002. Дои:10.1073 / пнас.71.5.1999. ЧВК  388372. PMID  4525471.
  6. ^ Киллари AM, Lott ST (февраль 1996 г.). «Производство гибридов микроэлементов». Методы. 9 (1): 3–11. Дои:10.1006 / мет.1996.0002. PMID  9245337.
  7. ^ Томизука К., Шинохара Т., Ёсида Х., Уэдзима Х., Огума А., Танака С., Сато К., Осимура М., Исида I. (январь 2000 г.). «Двойные трансхромосомные мыши: поддержание двух отдельных фрагментов хромосом человека, содержащих локусы тяжелой цепи Ig и каппа, и экспрессия полностью человеческих антител». Proc Natl Acad Sci USA. 97 (2): 722–7. Дои:10.1073 / пнас.97.2.722. ЧВК  15397. PMID  10639146.
  8. ^ Осимура М., Уно Н., Кадзуки И., Като М., Иноуэ Т. (февраль 2015 г.). «Путь от переноса хромосом до инженерии, в результате которого создаются искусственные хромосомы человека и мыши для различных применений, и заканчиваются биомедицинскими проблемами». Хромосома Res. 23 (1): 111–33. Дои:10.1007 / s10577-014-9459-z. ЧВК  4365188. PMID  25657031.