Триадин - Triadin

TRDN
Идентификаторы
Псевдонимы	TRDN, CPVT5, TDN, TRISK, триадин
Внешние идентификаторы	OMIM: 603283 MGI: 1924007 ГомолоГен: 38137 Генные карты: TRDN
Расположение гена (человек)
Chr.	Хромосома 6 (человек)
Конец	123,637,093 бп
Расположение гена (Мышь)
Chr.	Хромосома 10 (мышь)
Конец	33,476,709 бп
Генная онтология
Молекулярная функция	• связывание с белками, мостик; • GO: 0001948 связывание с белками; • рецепторное связывание; • связывание ионного канала;
Сотовый компонент	• комплекс потенциал-управляемых кальциевых каналов; • неотъемлемый компонент мембраны; • мембрана; • соединительная мембрана саркоплазматического ретикулума; • саркоплазматический ретикулум; • эндоплазматический ретикулум; • мембрана саркоплазматического ретикулума; • соединительный мембранный комплекс; • просвет саркоплазматического ретикулума; • цитозоль; • клеточная мембрана;
Биологический процесс	• положительное регулирование клеточной коммуникации посредством электрического взаимодействия, участвующего в сердечной проводимости; • регуляция сердечной проводимости; • сокращение мышц; • высвобождение секвестрированного иона кальция в цитозоль саркоплазматическим ретикулумом; • регулирование высвобождения секвестрированного иона кальция в цитозоль; • клеточный гомеостаз ионов кальция; • мембранная организация эндоплазматического ретикулума; • отрицательная регуляция активности рианодин-чувствительных каналов высвобождения кальция; • положительная регуляция активности рианодин-чувствительных каналов высвобождения кальция; • трансмембранный перенос ионов; • организация цитоплазматических микротрубочек; • регулирование межклеточной связи посредством электрической связи; • сердечное сокращение; • регуляция мембранного потенциала клеток сердечной мышцы; • регулирование высвобождения секвестрированного иона кальция в цитозоль саркоплазматическим ретикулумом; • реакция на бактерии;
	Источники:Amigo / QuickGO
Ортологи
	10345
	76757
	ENSG00000186439
	ENSMUSG00000019787
	Q13061
	E9Q9K5
	NM_001251987; NM_001256020; NM_001256021; NM_001256022; NM_006073
	NM_029726; NM_001364696; NM_001364697
NP_001238916; NP_001242949; NP_001242950; NP_001242951; NP_006064;
	NP_001242950.1
	NP_084002; NP_001351625; NP_001351626
	Викиданные
Просмотр / редактирование человека	Просмотр / редактирование мыши

Триадин, также известен как TRDN, это человек ген^[5] связанных с высвобождением ионов кальция из саркоплазматический ретикулум запуск мышечного сокращения через кальций-индуцированное высвобождение кальция. Триадин - это мультибелковое семейство, возникающее в результате различного процессинга гена TRDN на хромосома 6.^[6] Это трансмембранный белок саркоплазматического ретикулума из-за хорошо выраженной гидрофобной части.^[7]^[8] и он образует четвертичный комплекс с сердечной рецептор рианодина (RYR2 ), кальсеквестрин (CASQ2 ) и юнктин белки.^[7]^[8]^[9]^[10] В просвет (внутренний отдел саркоплазматического ретикулума) секция Триадина имеет области с высоко заряженными аминокислотными остатками, которые действуют как просвет Ca²⁺ рецепторы.^[7]^[8]^[10] Триадин также способен ощущать кальций в просвете.²⁺ концентрации, опосредуя взаимодействия между RYR2 и CASQ2.^[9] Триадин имеет несколько разные формы; Trisk 95 и Trisk 51, которые экспрессируются в скелетных мышцах, и Trisk 32 (CT1), которые в основном экспрессируются в сердечной мышце.^[11]

Взаимодействия

TRDN был показан взаимодействовать с RYR1.^[12]^[13]^[14]^[15]

Триадин необходим для физического соединения RYR2 и белки CASQ2, так что активность канала RYR2 может регулироваться с помощью CASQ2.^[16] Связывание RYR2 с CASQ2 происходит через высоко заряженные люминальные секции триадина.^[10] которые характеризуются как чередующиеся положительно и отрицательно заряженные аминокислоты, известные как мотив KEKE.^[8]^[9]^[10]^[17]

Люминальный уровни концентрации Ca²⁺ воспринимаются CSQ, и эта информация передается в RyR через Триадин. При низком уровне Ca в просвете²⁺ концентрациях, Triadin связывается как с RYR2, так и с CASQ2, так что CSQ предотвращает открытие RYR2. При высоком уровне Ca в просвете²⁺ концентрации, Ca²⁺ сайты связывания на CASQ2 становятся занятыми Ca²⁺, что приводит к ослаблению взаимодействия между CASQ2 и Triadin. Это устраняет способность CASQ2 оказывать ингибирующее действие на активность канала RYR2. Поскольку больше Ca²⁺ сайты связывания на CASQ2 становятся занятыми, увеличивается вероятность того, что канал RYR2 сможет открыться. В конце концов, CASQ2 полностью отделяется от триадина, и канал RYR2 становится полностью не ингибированным, хотя триадин остается связанным с RYR2 при всех концентрациях Ca в просвете.²⁺.^[16]

Связь с катехоламинергической полиморфной желудочковой тахикардией

Большинство мутаций, приводящих к CPVT обнаружены в генах RYR2 или CASQ2, однако у трети пациентов с CPVT нет мутаций ни в одном из этих белков, что делает мутацию в Triadin наиболее вероятной причиной^[18] Поскольку Триадин необходим для регуляции Са²⁺ высвобождение через канал RyR во время сердечного сокращения, мутация, которая предотвращает образование триадина, сделает CASQ2 неспособным ингибировать активность канала RYR2, позволяя Ca²⁺ утечки и развитие CPVT.^[18]

Удаление аминокислоты в гене TRDN может привести к раннему стоп-кодон.^[18] Преждевременный стоп-кодон может либо предотвратить ген от трансляции в белок Триадин, или может привести к укороченному, нефункциональному белку Триадин.^[18] Замена аминокислоты Аргинин для аминокислоты Треонин в положении 59 гена TRDN (pT59R) вызывает нестабильность триадина, что приводит к деградации белка.^[18] Любая из этих естественных мутаций приводит к отсутствию функционального белка триадина, что приводит к CPVT у пациентов.^[18]

использованная литература

^ ^а ^б ^c ГРЧ38: Ансамбль выпуск 89: ENSG00000186439 - Ансамбль, Май 2017
^ ^а ^б ^c GRCm38: выпуск Ensembl 89: ENSMUSG00000019787 - Ансамбль, Май 2017
^ "Справочник человека по PubMed:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США.
^ "Ссылка на Mouse PubMed:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США.
^ "Entrez Gene: TRDN триадин".
^ Thevenon, D .; Smida-Rezgui, S .; Chevessier, F .; Groh, S .; Генри-Бергер, Дж .; Romero, N.B .; Villaz, M .; Де Ваард, М. Марти, я (2003). «Триадин скелетных мышц человека: генная организация и клонирование основной изоформы Trisk 51». Biochem. Биофиз. Res. Сообщество. 303 (12): 669–675. Дои:10.1016 / с0006-291х (03) 00406-6. PMID 12659871.
^ ^а ^б ^c Kobayashi, Y.M .; Джонс, Л. Р. (1999). «Идентификация триадина 1 как преобладающей изоформы триадина, экспрессируемой в миокарде млекопитающих». J. Biol. Chem. 274 (40): 28660–28668. Дои:10.1074 / jbc.274.40.28660. PMID 10497235.
^ ^а ^б ^c ^d Jones, L.R .; Zhang, L .; Sanborn, K .; Jorgensen, A. O .; Келли., Дж. (1995). «Очистка, первичная структура и иммунологическая характеристика 26-кДа кальсеквестринсвязывающего белка (юнктина) из саркоплазматического ретикулума сердца». J. Biol. Chem. 270 (51): 30787–30796. Дои:10.1074 / jbc.270.51.30787. PMID 8530521.
^ ^а ^б ^c Zhang, L .; Kelley, J .; Schmeisser, G .; Kobayashi, Y.M .; Джонс, Л. Р. (1997). «Комплексообразование между юнктином, триадином, кальсеквестрином и рецептором рианодина. Белки мембраны саркоплазматического ретикулума сердечного соединения». J. Biol. Chem. 272 (37): 23389–23397. Дои:10.1074 / jbc.272.37.23389. PMID 9287354.
^ ^а ^б ^c ^d Kobayashi, Y.M .; Alseikhan, B.A .; Джонс, Л. Р. (2000). «Локализация и характеристика кальсеквестрин-связывающего домена триадина 1. Доказательства того, что заряженная бета-цепь опосредует белок-белковое взаимодействие». J. Biol. Chem. 275 (23): 17639–17646. Дои:10.1074 / jbc.M002091200. PMID 10748065.
^ Марти, I .; Fauré, J .; Fourest-Lieuvin, A .; Vassilopoulos, S .; Oddoux, S .; Брокар, Дж. (2009). «Триадин: какова возможная функция 20 лет спустя?». J. Physiol. 587 (13): 3117–3121. Дои:10.1113 / jphysiol.2009.171892. ЧВК 2727022. PMID 19403623.
^ Ли, Джэ Ман; Ро Сон-Хван; Шин Дон Ук; Чо Чонхи; Пак У Джин; Ём Су Хён; Ма Цзяньцзе; Ким До Хан (февраль 2004 г.). «Отрицательно заряженные аминокислоты внутрипросветной петли рецептора рианодина участвуют во взаимодействии с триадином». J. Biol. Chem. Соединенные Штаты. 279 (8): 6994–7000. Дои:10.1074 / jbc.M312446200. ISSN 0021-9258. PMID 14638677.
^ Caswell, AH; Motoike H K; Fan H; Brandt N R (январь 1999 г.). «Расположение сайта связывания рецептора рианодина на триадине скелетных мышц». Биохимия. Соединенные Штаты. 38 (1): 90–7. Дои:10.1021 / bi981306 +. ISSN 0006-2960. PMID 9890886.
^ Guo, W; Кэмпбелл К. П. (апрель 1995 г.). «Ассоциация триадина с рецептором рианодина и кальсеквестрином в просвете саркоплазматической сети». J. Biol. Chem. Соединенные Штаты. 270 (16): 9027–30. Дои:10.1074 / jbc.270.16.9027. ISSN 0021-9258. PMID 7721813.
^ Groh, S; Марти I; Ottolia M; Prestipino G; Часовня А; Villaz M; Ronjat M (апрель 1999 г.). «Функциональное взаимодействие цитоплазматического домена триадина со скелетным рианодиновым рецептором». J. Biol. Chem. Соединенные Штаты. 274 (18): 12278–83. Дои:10.1074 / jbc.274.18.12278. ISSN 0021-9258. PMID 10212196.
^ ^а ^б Gyorke, I .; Hester, N .; Jones, L.R .; Гёрке, С. (2004). «Роль кальсеквестрина, триадина и юнктина в повышении чувствительности сердечных рецепторов к рианодину на кальций в просвете». Биофизический журнал. 86 (4): 2121–2128. Bibcode:2004BpJ .... 86.2121G. Дои:10.1016 / S0006-3495 (04) 74271-X. ЧВК 1304063. PMID 15041652.
^ Шин, Д. В .; Ma, J .; Ким, Д. Х. (2000). "Богатая аспатом область на карбоксильном конце кальсеквестрина связывается с Са²⁺ и взаимодействует с триадином ». FEBS Lett. 486 (2): 178–182. Дои:10.1016 / S0014-5793 (00) 02246-8. PMID 11113462. S2CID 3135618.
^ ^а ^б ^c ^d ^е ^ж Roux-Buisson, N .; Cacheux, M .; Fourest-Lieuvin, A .; Fauconnier, J .; Brocard, J .; Denjoy, I .; Durand, P .; Guicheney, P .; Kyndt, F .; Leenhardt, A .; Le Marec, H .; Lucet, V .; Mabo, P .; Пробст, В .; Monnier, N .; Ray, P. F .; Santoni, E .; Tremeaux, P .; Lacampagne, A .; Faure, J .; Lunardi, J .; Марти, И. (2012). «Отсутствие триадина, белка комплекса высвобождения кальция, вызывает сердечную аритмию с внезапной смертью человека». Молекулярная генетика человека. 21 (12): 2759–2767. Дои:10.1093 / hmg / dds104. ЧВК 3363337. PMID 22422768.

дальнейшее чтение

Таске Н.Л., Эйр Х.Дж., О'Брайен Р.О. и др. (1995). «Молекулярное клонирование кДНК, кодирующей триадин скелетных мышц человека, и его локализация в хромосоме 6q22-6q23». Евро. J. Biochem. 233 (1): 258–65. Дои:10.1111 / j.1432-1033.1995.258_1.x. PMID 7588753.
Гуо В., Кэмпбелл КП (1995). «Ассоциация триадина с рецептором рианодина и кальсеквестрином в просвете саркоплазматической сети». J. Biol. Chem. 270 (16): 9027–30. Дои:10.1074 / jbc.270.16.9027. PMID 7721813.
Чжан Л., Келли Дж., Шмайссер Дж. И др. (1997). «Комплексообразование между юнктином, триадином, кальсеквестрином и рецептором рианодина. Белки мембраны саркоплазматического ретикулума сердечного соединения». J. Biol. Chem. 272 (37): 23389–97. Дои:10.1074 / jbc.272.37.23389. PMID 9287354.
Caswell AH, Motoike HK, Fan H, Brandt NR (1999). «Расположение сайта связывания рецептора рианодина на триадине скелетных мышц». Биохимия. 38 (1): 90–7. Дои:10.1021 / bi981306 +. PMID 9890886.
Гро С., Марти И., Оттолия М. и др. (1999). «Функциональное взаимодействие цитоплазматического домена триадина со скелетным рианодиновым рецептором». J. Biol. Chem. 274 (18): 12278–83. Дои:10.1074 / jbc.274.18.12278. PMID 10212196.
Саккетто Р., Теркато Ф., Дамиани Э., Маргрет А. (1999). "Взаимодействие триадина с богатым гистидином Ca²⁺-связывающий белок в тройном соединении волокон скелетных мышц ». J. Muscle Res. Cell. Мотил. 20 (4): 403–15. Дои:10.1023 / А: 1005580609414. PMID 10531621. S2CID 21796512.
Кобаяши Ю.М., Алсейхан Б.А., Джонс Л.Р. (2000). «Локализация и характеристика кальсеквестрин-связывающего домена триадина 1. Доказательства того, что заряженная бета-цепь опосредует белок-белковое взаимодействие». J. Biol. Chem. 275 (23): 17639–46. Дои:10.1074 / jbc.M002091200. PMID 10748065.
Кирххефер У., Нойман Дж., Баба Х.А. и др. (2001). «Гипертрофия сердца и нарушение расслабления у трансгенных мышей, сверхэкспрессирующих триадин 1». J. Biol. Chem. 276 (6): 4142–9. Дои:10.1074 / jbc.M006443200. PMID 11069905.
Шин Д.В., Ма Дж., Ким Д.Х. (2001). "Богатая аспатом область на карбоксильном конце кальсеквестрина связывается с Са²⁺ и взаимодействует с триадином ». FEBS Lett. 486 (2): 178–82. Дои:10.1016 / S0014-5793 (00) 02246-8. PMID 11113462. S2CID 3135618.
Ли Х.Г., Кан Х., Ким Д.Х., Пак В.Дж. (2001). "Взаимодействие HRC (гистидин-богатый Ca²⁺-связывающий белок) и триадин в просвете саркоплазматического ретикулума ». J. Biol. Chem. 276 (43): 39533–8. Дои:10.1074 / jbc.M010664200. PMID 11504710.
Хонг С.С., Джи Дж. Х., Ким Дж. П. и др. (2002). «Молекулярное клонирование и характеристика изоформ сердечного триадина мыши». Ген. 278 (1–2): 193–9. Дои:10.1016 / S0378-1119 (01) 00718-1. PMID 11707337.
Strausberg RL, Feingold EA, Grouse LH, et al. (2003). «Создание и первоначальный анализ более 15 000 полноразмерных последовательностей кДНК человека и мыши». Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 99 (26): 16899–903. Bibcode:2002ПНАС ... 9916899М. Дои:10.1073 / pnas.242603899. ЧВК 139241. PMID 12477932.
Ким Э., Шин Д.В., Хонг С.С. и др. (2003). "Повышенный Ca²⁺ емкость хранения в саркоплазматическом ретикулуме за счет сверхэкспрессии HRC (богатый гистидином Ca²⁺ связывающий белок) ». Biochem. Биофиз. Res. Сообщество. 300 (1): 192–6. Дои:10.1016 / S0006-291X (02) 02829-2. PMID 12480542.
Тевенон Д., Смида-Резгуи С., Шевесье Ф. и др. (2003). «Триадин скелетных мышц человека: генная организация и клонирование основной изоформы Trisk 51». Biochem. Биофиз. Res. Сообщество. 303 (2): 669–75. Дои:10.1016 / S0006-291X (03) 00406-6. PMID 12659871.
Ли Дж. М., Ро Ш., Шин Д. В. и др. (2004). «Отрицательно заряженные аминокислоты внутрипросветной петли рецептора рианодина участвуют во взаимодействии с триадином». J. Biol. Chem. 279 (8): 6994–7000. Дои:10.1074 / jbc.M312446200. PMID 14638677.
Олсен Ю.В., Благоев Б., Гнад Ф. и др. (2006). «Глобальная, in vivo и сайт-специфическая динамика фосфорилирования в сигнальных сетях». Ячейка. 127 (3): 635–48. Дои:10.1016 / j.cell.2006.09.026. PMID 17081983. S2CID 7827573.
Арванитис Д.А., Вафиадаки Э., Фан Г.К. и др. (2007). «Богатый гистидином Са-связывающий белок взаимодействует с Са-АТФазой саркоплазматического ретикулума». Am. J. Physiol. Heart Circ. Физиол. 293 (3): H1581–9. Дои:10.1152 / ajpheart.00278.2007. PMID 17526652.

внешняя ссылка

TRDN расположение человеческого гена в Браузер генома UCSC.
TRDN детали человеческого гена в Браузер генома UCSC.

[refGRCh38Ensembl-1] а ^б ^c ГРЧ38: Ансамбль выпуск 89: ENSG00000186439 - Ансамбль, Май 2017

[refGRCm38Ensembl-2] а ^б ^c GRCm38: выпуск Ensembl 89: ENSMUSG00000019787 - Ансамбль, Май 2017

[3] "Справочник человека по PubMed:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США.

[4] "Ссылка на Mouse PubMed:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США.

[entrez-5] "Entrez Gene: TRDN триадин".

[6] Thevenon, D .; Smida-Rezgui, S .; Chevessier, F .; Groh, S .; Генри-Бергер, Дж .; Romero, N.B .; Villaz, M .; Де Ваард, М. Марти, я (2003). «Триадин скелетных мышц человека: генная организация и клонирование основной изоформы Trisk 51». Biochem. Биофиз. Res. Сообщество. 303 (12): 669–675. Дои:10.1016 / с0006-291х (03) 00406-6. PMID 12659871.

[second-7] а ^б ^c Kobayashi, Y.M .; Джонс, Л. Р. (1999). «Идентификация триадина 1 как преобладающей изоформы триадина, экспрессируемой в миокарде млекопитающих». J. Biol. Chem. 274 (40): 28660–28668. Дои:10.1074 / jbc.274.40.28660. PMID 10497235.

[third-8] а ^б ^c ^d Jones, L.R .; Zhang, L .; Sanborn, K .; Jorgensen, A. O .; Келли., Дж. (1995). «Очистка, первичная структура и иммунологическая характеристика 26-кДа кальсеквестринсвязывающего белка (юнктина) из саркоплазматического ретикулума сердца». J. Biol. Chem. 270 (51): 30787–30796. Дои:10.1074 / jbc.270.51.30787. PMID 8530521.

[fourth-9] а ^б ^c Zhang, L .; Kelley, J .; Schmeisser, G .; Kobayashi, Y.M .; Джонс, Л. Р. (1997). «Комплексообразование между юнктином, триадином, кальсеквестрином и рецептором рианодина. Белки мембраны саркоплазматического ретикулума сердечного соединения». J. Biol. Chem. 272 (37): 23389–23397. Дои:10.1074 / jbc.272.37.23389. PMID 9287354.

[fifth-10] а ^б ^c ^d Kobayashi, Y.M .; Alseikhan, B.A .; Джонс, Л. Р. (2000). «Локализация и характеристика кальсеквестрин-связывающего домена триадина 1. Доказательства того, что заряженная бета-цепь опосредует белок-белковое взаимодействие». J. Biol. Chem. 275 (23): 17639–17646. Дои:10.1074 / jbc.M002091200. PMID 10748065.

[11] Марти, I .; Fauré, J .; Fourest-Lieuvin, A .; Vassilopoulos, S .; Oddoux, S .; Брокар, Дж. (2009). «Триадин: какова возможная функция 20 лет спустя?». J. Physiol. 587 (13): 3117–3121. Дои:10.1113 / jphysiol.2009.171892. ЧВК 2727022. PMID 19403623.

[pmid14638677-12] Ли, Джэ Ман; Ро Сон-Хван; Шин Дон Ук; Чо Чонхи; Пак У Джин; Ём Су Хён; Ма Цзяньцзе; Ким До Хан (февраль 2004 г.). «Отрицательно заряженные аминокислоты внутрипросветной петли рецептора рианодина участвуют во взаимодействии с триадином». J. Biol. Chem. Соединенные Штаты. 279 (8): 6994–7000. Дои:10.1074 / jbc.M312446200. ISSN 0021-9258. PMID 14638677.

[pmid9890886-13] Caswell, AH; Motoike H K; Fan H; Brandt N R (январь 1999 г.). «Расположение сайта связывания рецептора рианодина на триадине скелетных мышц». Биохимия. Соединенные Штаты. 38 (1): 90–7. Дои:10.1021 / bi981306 +. ISSN 0006-2960. PMID 9890886.

[pmid7721813-14] Guo, W; Кэмпбелл К. П. (апрель 1995 г.). «Ассоциация триадина с рецептором рианодина и кальсеквестрином в просвете саркоплазматической сети». J. Biol. Chem. Соединенные Штаты. 270 (16): 9027–30. Дои:10.1074 / jbc.270.16.9027. ISSN 0021-9258. PMID 7721813.

[pmid10212196-15] Groh, S; Марти I; Ottolia M; Prestipino G; Часовня А; Villaz M; Ronjat M (апрель 1999 г.). «Функциональное взаимодействие цитоплазматического домена триадина со скелетным рианодиновым рецептором». J. Biol. Chem. Соединенные Штаты. 274 (18): 12278–83. Дои:10.1074 / jbc.274.18.12278. ISSN 0021-9258. PMID 10212196.

[seventh-16] а ^б Gyorke, I .; Hester, N .; Jones, L.R .; Гёрке, С. (2004). «Роль кальсеквестрина, триадина и юнктина в повышении чувствительности сердечных рецепторов к рианодину на кальций в просвете». Биофизический журнал. 86 (4): 2121–2128. Bibcode:2004BpJ .... 86.2121G. Дои:10.1016 / S0006-3495 (04) 74271-X. ЧВК 1304063. PMID 15041652.

[17] Шин, Д. В .; Ma, J .; Ким, Д. Х. (2000). "Богатая аспатом область на карбоксильном конце кальсеквестрина связывается с Са²⁺ и взаимодействует с триадином ». FEBS Lett. 486 (2): 178–182. Дои:10.1016 / S0014-5793 (00) 02246-8. PMID 11113462. S2CID 3135618.

[ninth-18] а ^б ^c ^d ^е ^ж Roux-Buisson, N .; Cacheux, M .; Fourest-Lieuvin, A .; Fauconnier, J .; Brocard, J .; Denjoy, I .; Durand, P .; Guicheney, P .; Kyndt, F .; Leenhardt, A .; Le Marec, H .; Lucet, V .; Mabo, P .; Пробст, В .; Monnier, N .; Ray, P. F .; Santoni, E .; Tremeaux, P .; Lacampagne, A .; Faure, J .; Lunardi, J .; Марти, И. (2012). «Отсутствие триадина, белка комплекса высвобождения кальция, вызывает сердечную аритмию с внезапной смертью человека». Молекулярная генетика человека. 21 (12): 2759–2767. Дои:10.1093 / hmg / dds104. ЧВК 3363337. PMID 22422768.

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]

[7]

[8]

[9]

[10]

[11]

[12]

[13]

[14]

[15]

[16]

[17]

[18]