Гемагглютинин эстераза - Hemagglutinin esterase

HE, SNGH эстеразный домен
Идентификаторы
Символ?
ИнтерПроIPR007142
HE, гемагглютининовый домен
Идентификаторы
Символ?
ИнтерПроIPR003860

Гемагглютинин эстераза (HE) это гликопротеин что определенный оболочечные вирусы владеть и использовать в качестве механизма вторжения. HE помогает в привязанность и уничтожение некоторых сиаловая кислота рецепторы, которые находятся на хозяин поверхность клетки.[1] Вирусы, обладающие HE, включают: Вирус гриппа С, торовирусы, и коронавирусы (но нет SARS-подобные коронавирусы ). HE - это димер трансмембранный белок состоящий из двух мономеров, каждый мономер состоит из трех домены. Эти три области: мембранный сплав, эстераза, и рецепторное связывание домены.

Различные активности ферментов HE включают: активность связывания рецептора, активность рецептора гидролиз (эстераза ) активность и активность слияния мембран. Активность связывания рецептора включает прикрепление HE к N-ацетил-9-O-ацетилнейраминовая кислота (9-O-Ac-Neu5Ac) из гликолипиды и гликопротеины, которые, в свою очередь, служат вирусным рецептором.[2] Активность гидролиза рецепторов (эстеразы) позволяет вирусным частицам покинуть инфицированную клетку, удаляя ацетильная группа от положения C9 концевых остатков 9-O-Ac-Neu5Ac.[2] Активность слияния мембран способствует включению вирусных геном в клетку-хозяин цитоплазма за счет усиления связи между вирусной оболочкой и хозяином клеточная мембрана.

В определенных Вирусы гриппа, поверхность клетки состоит как из Гемагглютинин (HA) и Нейраминидаза (NA) белки, которые включают ферментативную активность, тогда как слитые белки гемагглютинин-эстераза (HEF) оказались первичными единичными белками. пиковый белок который сочетает в себе все перечисленные выше ферментативные активности. Белки HEF были протестированы на устойчивость к высоким температурам и низким pH и являются основным источником вирулентности вирусов.[3] Грипп C было показано, что у них есть уникальные структурные белки HEF, которые увеличивают его способность инфицировать клетку-хозяин по сравнению с Грипп А и B.

Сворачивание различных доменов в белке гемагглютинин-эстеразы важно для внутриклеточный транспорт белков из эндоплазматический ретикулум к аппарат Гольджи. Наличие олигосахарид Цепи в доменах E, F и R фермента HE также влияют на внутриклеточный транспорт. Ацилирование гемагглютинин-эстеразы играет важную роль в репликации сборки вирусных частиц. Точный процесс ферментативного каталитического расщепления еще не выяснен. Однако, протеолитическое расщепление должно произойти до слияния гемагглютинин-эстеразы мембран. Белки HEF имеют уникальное гексагональное расположение шипов. Эта функция уникальна для Вирус гриппа С частицы. Расположение - это покрытие снаружи частицы.

Строение белка гемагглютинин эстеразы.

Структура

Некоторые исследования показали, что коронавирус и торовирусы HE произошли от гликопротеина HEF, который обнаружен в вирусах гриппа C, который возник в результате изменения эстеразы гемагглютинина из тримера в димерный гликопротеин.[1] При этом рецептор-разрушающий ферментный домен ацетилэстеразы оставался неизменным. Однако домен связывания рецептора HE был изменен, в котором лиганд связан в противоположной ориентации, чем раньше.[1] Мономеры HE коронавируса и торовируса состоят из одних и тех же трех доменов, а именно: центральный домен эстеразы / гидролазы, связывание рецептора. лектин домен, а проксимальный домен мембраны небольшой.[4] Мономеры HE как коронавируса (CoV), так и торовирусов (ToV) состоят из одних и тех же трех доменов: центрального домена эстеразы / гидролазы, рецепторсвязывающего лектинового домена и малого проксимального домена мембраны.[4] Два мономера димера HE в CoV и ToV включают одни и те же две контактные области (CR 1 и 2). CR 1 содержат рецептор-связывающий домен и контактную область 2, которые содержат проксимальный домен мембраны. Тем не менее, область контакта 2 ToV HE содержит дополнительный домен эстеразы. В результате поверхность CR 2 больше в HE ToV, чем в HE CoV. Однако, рядом с якорем карбоксильной терминальной мембраны, имеется ряд дисульфидные мостики между Cys385 коронавируса HE, которые, в свою очередь, удерживают димеры HE связанными друг с другом.[4]

В CoV HE два домена R бета-листы соединены друг с другом, образуя непрерывный межмолекулярный бета-слой через границу раздела димеров. С другой стороны, в ToV они ориентированы под углами. В результате бета-лист рецепторсвязывающего домена в ToV более скручен, область контакта 1 меньше, а положение R-доменов смещено вдоль бета-цепей по сравнению с CoV.[4]

Кристаллическая структура

«Первоначальные исследования с помощью электронной микроскопии показали, что шип HEF образует грибовидный тример, состоящий из стебля, расположенного рядом с мембраной, и шаровидной головки».[2]

Более поздние исследования позволили изучить и показать структуру с более высоким разрешением (4,5 Å) гибридного тримера гемагглютинин эстеразы с использованием Рентгеновская кристаллография из бромелайн -срезанный эктодомен. Слитый белок гемагглютинин и гемагглютинин эстераза схожи с точки зрения структуры и укладки отдельных сегментов. тем не менее, только 12% аминокислот идентичны между HA и HEF. Одно существенное различие между HE и HEF заключается в наличии дополнительной выпуклости в глобулярном домене HEF (нижняя часть домена), который содержит область эстеразы. Рецептор-связывающая область как в HA, так и в HEF находится в верхней части домена и содержит только остатки HEF1. Стебель состоит из трех α-спиралей длиной 60 Å, которые содержат: все последовательности последовательности HEF2 и определенные остатки HEF1, которые являются N-концевыми остатками (1–40), и C-концевыми остатками (367–432).[2]

Кристаллическая структура показывает, что способ связывания HEF с 9-O-Ac-Neu5Ac такой же, как и способ связывания HA с Neu5Ac. Связывающие части включают α-спираль, петлю и удлиненную цепь. Между аминокислотами (Tyr127, Thr170, Gly172, Tyr227 и Arg292) и гидроксильными группами лиганда существуют водородные связи, а другие остатки образуют структурную опору сайта связывания рецептора. Уникальный гидрофобный карман присутствует в сайте связывания HEF, который, в свою очередь, вмещает ацетилметильную группу.[2]

Мероприятия

Рецептор-связывающая активность

Гликолипиды и гликопротеины содержат N-ацетил-9-O-ацетилнейраминовую кислоту (9-O-Ac-Neu5Ac), которая служит вирусным рецептором, с которым связывается HEF. HEF может связываться со своим рецептором независимо от того, присоединен ли 9-O-Ac-Neu5Ac посредством α-2,3 или α-2,6 связи к следующему остатку галактозила. Однако на специфичность хозяина может влиять терминальная N-ацетилнейраминовая кислота (Neu5Ac) и гликозидная связь Neu5Ac. Вирус гриппа С может распознавать 9-O-Ac-Neu5Ac на поверхности различных клеток благодаря своей уникальной рецепторной специфичности.[2]

Рецепторная гидролизная (эстеразная) активность

Рецепторная гидролазная активность HEF способствует высвобождению вирусных частиц из инфицированной клетки с использованием фермента эстеразы, который отщепляет ацетил в положении C9 концевого 9-O-Ac-Neu5Ac. Активность эстеразы HEF, которая является частью сериновая гидролаза класс включает нуклеофильный атака гидроксильной группы (ОН) сериновой аминокислоты с помощью двух других аминокислот (гистидина и аспарагиновой кислоты) на карбонильную группу субстрата. Основной гистидин увеличивает реакционную способность серина за счет поляризации и депротонирования его гидроксильной группы. Вместе с тем аспарагиновая кислота поляризует гистидин.[2]

Рентгеновская кристаллография кристаллической структуры HEF показала, что серин 57, аспарагиновая кислота 352 и гистидин 355 являются важными аминокислотами для активности эстеразы. Кроме того, ранние исследования показали, что мутации в остатках Ser57 и His355 могут полностью остановить эстеразную активность HEF.[2]

Активность слияния мембран

Активность слияния мембран между вирусной оболочкой и эндоцитарными везикулами клетки-хозяина важна для того, чтобы помочь вирусу ввести свой геном в цитоплазму клетки. Чтобы активировать слияние мембран, необходимо предварительно провести расщепление белков-предшественников HEF0 и HA0 на субъединицы на субъединицы HEF1 и HEF2, а затем подвергнуть эти белки воздействию кислого pH.[2]

Кислый pH причины протонирование специфических аминокислот, которые инициируют определенные перестройки белков. Обнаружено, что протонированной аминокислотой является гистидин, тогда как ее pKa соответствует pH эндосомы. Исследования показали, что разница в значениях pH составляет около 0,7, которые запускают активность слияния мембран от штамма к штамму гриппа A и C.[2]

Конформационные изменения в структуре HEF, которые происходят при низком pH, приводят к отделению гибридного пептида от его местоположения в нижней части стебля и обнажают внешнюю поверхность молекулы, чтобы его можно было вставить в эндосомальную мембрану. Происходит другое конформационное изменение, которое вызывает изгиб эктодомена, чтобы подтолкнуть слитый пептид к трансмембранной области. В результате вирус и эндосомные мембраны сближаются, обменивая липиды с гемифузией. Затем происходит открытие поры слияния и, в конечном итоге, полное слияние обоих липидных бислоев.[2]

Сворачивание и внутриклеточный транспорт

Сворачивание белка гемагглютининэстеразы и способ сборки доменов белка способствуют транспортировке мембранных и секреторных белков из эндоплазматического ретикулума в аппарат Гольджи. Исследователи обнаружили, что тримеризация происходит перед выходом из ER.[5] Перед сборкой мономеры белка HE складываются. Прежде чем гемагглютининэстераза сможет сообщить об этом аппарату Гольджи, ее необходимо тщательно сложить и собрать.

Структура гемагглютинин-эстеразы способствует внутриклеточному транспорту. Гликопротеин гемагглютинин-эстеразы (HE) Вирус гриппа С состоит из трех доменов: стержневого домена, активного в слиянии мембран (F), домена ацетилэстеразы (E) и рецептор-связывающего домена (R).[6] Белок содержит восемь сайтов N-связанного гликозилирования, четыре (положения 26, 395, 552 и 603) в домене F, три (положения 61, 131 и 144) в домене E и один (положение 189) в R домен.[6] Цепи олигосахаридов в доменах влияют на внутриклеточный транспорт. Исследование показало, что было очевидно, что гликозилирование в двух сайтах в F-домене (положения 26 и 603), в дополнение к таковому в E-домене (позиция 144), необходимо для транспорта молекулы HE из эндоплазматического ретикулума. и что мутантные HE, лишенные одного из этих трех сайтов, не смогли подвергнуться сборке тримеров.[6] Олигосахариды необходимы для поддержания активности эстеразы в доменах F и R. Если в каком-либо из доменов отсутствует олигосахаридная цепь, это повлияет на экспрессию на поверхности клетки. Было обнаружено, что мономеры HE обладают ацетилэстеразной активностью, поскольку они обладают полноферментной активностью, несмотря на отсутствие олигосахаридной цепи.[6] Олигосахаридные цепи важны для внутриклеточного транспорта, но не для активности слияния. Таким образом, олигосахаридные цепи на самом деле не способствуют слиянию мембран.

S-ацилирование и RAFT-локализация

Ацилирование фермента гемагглютинин-эстеразы необходимо для репликации вируса Вирус гриппа С. Было обнаружено, что рекомбинантный вирус отсутствие сайта ацилирования HEF может быть спасено, но вирусные титры были уменьшены на один журнал относительно дикого типа Грипп C.[2] Полученные вирусные частицы имеют обычный белковый состав, и никакие изменения их морфологии не были очевидны при электронной микроскопии, но их гемолитическая активность снижена, что свидетельствует о дефекте слияния мембран.[2] Это по сравнению с несколькими подтипами белка НА, которые показали аналогичные результаты.

Слитый белок гемагглютинин-эстераза имеет со- и посттрансляционная модификация, такие как N-гликозилирование, образование дисульфидной связи, S-ацилирование и протеолитическое расщепление на субъединицы HEF1 и HEF2.[2] Белок HEF Вирус гриппа С имеет только один стеарат, присоединенный к трансмембранному цистеину. В то время как HA вируса гриппа A и B связаны с мембранными рафтами, обогащенными холестерином и сфинголипидом нанодоменами плазматической мембраны, считается, что HEF локализуется в основной фазе плазматической мембраны.[2]

Протеолитическое расщепление

Свойства связывания и расщепления Грипп Cбелок гемагглютинин-эстеразы (CHE) вирионов для 9-О-ацетильные группы сиаловых кислот использовались в различных анализах с использованием целых вирионы.[7]

Протеолитическое расщепление должно происходить до любой активности слияния мембран HE, поскольку оно позволяет белку активироваться при низком pH. HEF белки из всех Вирус гриппа С Штаммы содержат одноосновный сайт расщепления и в этом отношении сходны с НА из вирусов гриппа А человека, свиней, лошадей и низкопатогенных птиц.[2] Сайты многоосновного расщепления, которые присутствуют в HA высокопатогенных вирусов птичьего гриппа A и процессируются повсеместно распространенной протеазой фурин не обнаруживаются ни в одном белке HEF. Следовательно, репликация Вирус гриппа С ограничивается местом заражения вирусом, дыхательными путями.[2] В отличие от других вирусов гриппа, Вирус гриппа С не распространяется на другие ткани. Несколько циклов репликации Вирус гриппа С в культуре ткани активируются добавлением трипсина, тогда как яйца с эмбрионами продуцируют инфекционный вирус с расщепленным HEF.[2]

Фермент, катализирующий протеолитическое расщепление HEF, до сих пор не идентифицирован, но поскольку и HA, и HEF могут расщепляться трипсином в одинаковых концентрациях. in vitro(5 ~ 20 мкг / мл) вполне вероятно, что они также активируются теми же ферментами внутри клеток.[2] Очень часто HA сравнивают с HEF во многих контекстах.

Регулярное расположение спайков HE в вирусных частицах

Единственный всплеск Вирус гриппа Сгликопротеин слияния гемагглютинин-эстераза (HEF) сочетает в себе активность связывания рецептора, гидролиза рецептора и слияния мембран.[8] Как и другие гемагглютинирующие гликопротеины вирусов гриппа, HEF S-ацилирован, но только с стеариновая кислота у единственного цистеина, расположенного на обращенном к цитозоле конце трансмембранной области.[8] Однако этот белок HE также имеет шипы в своей структурной организации.

Тримеры HEF на поверхности как сферических, так и нитевидных частиц расположены в сетчатой ​​структуре, которая, как было описано, состоит в основном из шестиугольников.[2] Эта функция уникальна для Вирус гриппа С частицы. Даже когда HEF удаляется из мембраны, полимерная сетчатая структура, которая у нее изначально была, все еще видна. Эти результаты указывают на то, что гексагональное расположение является внутренней особенностью HEF и не требует других вирусных белков, таких как M1, и что его образование, вероятно, включает латеральное взаимодействие между эктодоменами HEF.[2] Образование шипов в вирусных частицах действует как оболочка вокруг вирусной частицы, создавая и покрывая ее. Это похоже на гидрофобный эффект в двухслойных липидных мембранах, где молекулы неполярны, и внутри.

Расположение сайтов N-гликозилирования

Сайты N-гликозилирования HEF расположены на рисунке 1. Один секвон находится в HEF2 и шесть - в HEF1. Их три в шаровидной головке и 2 в шарнирной области, которая соединяет стебель с головкой. Сайт в положении 589 не гликозилирован, поскольку он расположен слишком близко к области, охватывающей мембрану, и не может быть доступен для олигосахаридтрансферазы. Гликозилирование имеет решающее значение для правильного фолдинга, поскольку оно защищает его от протеолитической деградации со стороны клетки-хозяина и важно для представление антигенного эпитопы.[2]

При гриппе C

Первичная структура HEF при гриппе C содержит 641 аминокислоту. Это типичный трансмембранный белок типа 1 с коротким N-концом, расщепляемым сигнальным пептидом, длинным эктодоменом, трансмембранной областью и очень коротким цтиоплазматическим хвостом. HEF состоит из двух субъединиц, HEF1, состоящего из N-конца, и HEF2, состоящего из трансмембранного домена и цитоплазматического хвоста. Электронная микроскопия, анализирующая кристаллическую структуру HEF, показала, что острие HEF образует грибовидный тример, состоящий из стебля, прилегающего к мембране, и шаровидной головки. HEF содержит только аспарагин -связанные углеводы, что указывает на то, что О-гликозилирование не происходит. Расположение отдельных сайтов гликозилирования в кристаллической структуре находится на семи из восьми высококонсервативных N-гликозилирование секвоны; один расположен в субъединице, HEF2, а остальные 6 расположены в субъединице HEF1. Три участка находятся в шаровидной головке и два - в области шарнира, соединяющего стебель с головкой. В положении 589 на кристаллизованной структуре есть сайт, который не гликозилирован, и это может быть связано с близким расположением к участкам, охватывающим мембрану, и не может быть доступно для олигосахаридтрансферазы. Положение HA в гриппе A очень похоже на положение HA в гриппе C, поскольку большинство его углеводных положений находится в более крупной субъединице.[2]

Расположение внутримолекулярных дисульфидных связей

В HEF1 12/15 остатков цистеина образуют 6 внутрицепочечных дисульфидных связей, которые стабилизируют глобулярный головной домен. Есть два остатка цистеина, Cys373 и Cys399, которые не образуют дисульфидных связей в зрелом белке. Они расположены у шарнира, соединяющего шаровидную головку с областью стебля. Остальные остатки цистеина образуют межцепочечные дисульфидные связи с HEF в области эктодомена, около дна тримера. Эти дисульфидные связи в HEF2 позволяют субъединице выполнять большие конформационные изменения, которые катализируют слияние мембран.[2]

В вирусах гриппа

При гриппе C в субъединице HEF1 содержится 15 остатков цистеина, 12 из которых образуют шесть внутрицепочечных дисульфидных связей, которые стабилизируют глобулярный головной домен. Два остатка цистеина не требуются для правильной укладки и функции HEF, и / или они не образуют дисульфидную связь в зрелом белке, расположенном на шарнире соединения. Оставшийся остаток цистеина образует межцепочечную дисульфидную связь с единственным остатком цистеина в эктодомене субъединицы HEF2. Этот остаток находится на дне тримера. Для сравнения, Influenza A имеет аналогичное распределение дисульфидных связей с одной связью, соединяющей HA1 с HA2, большинство из которых являются внутрицепочечными связями. Редкое появление дисульфидных связей в субъединицах HEF2 и HA2 позволяет этим субъединицам выполнять большие конформационные изменения, которые катализируют слияние мембран.[2]

Ко- и постпереводная модификация

Во время транслокации HEF в просвет ER N-концевой сигнальный пептид отщепляется, и углеводы присоединяются. Связи дисульфидных связей образуются и реконструируются. Эти модификации влияют на фолдинг и тримеризацию молекулы. Эти процессы являются предпосылками для выхода груза из ER. Позже цепь жирных кислот присоединяется к цистеину, расположенному на конце трансмембранного участка, и HEF расщепляется на 2 субъединицы, этот процесс важен для репликации вируса.[2]

В вирусах гриппа

Для сравнения, грипп A, B и C имеет разные белки-шипы, гемагглютинин и нейраминидазу. Поверхностный гликопротеин HEF гриппа C состоит из трех видов активности: связывания с рецептором, инактивации рецептора и активности слияния. Связывание с рецептором опосредует прикрепление вируса к N-ацетил-9-O-ацетилнейраминовой кислоте на поверхности клетки, инактивация рецептора высвобождает 9-O-ацетильную группу из N-ацетил-9-O-ацетилнейраминовой кислоты и слияние активность зависит от посттрансляционного протеолитического расщепления HEF на две субъединицы, а также от воздействия кислой среды. В условиях низкого pH происходит конформационное изменение HEF. При гриппе А перестройка гидрофобных последовательностей на N-конце субъединицы HEF2 становится открытой и вызывает слияние вирусной оболочки с мембраной клетки-мишени.[9] Другой способ слияния вирусной оболочки с клеткой-хозяином - эндоцитозные везикулы. HEF не отщепляет концевой остаток кремнеземной кислоты от углеводов, но удаляет ацетильную группу из положения C9 N-ацетил-9-O-ацетилнейраминовой кислоты. Это необходимо для высвобождения частиц свежего почкованного вируса из инфицированных клеток, которые в противном случае были бы захвачены плазматической мембраной, если рецептор все еще присутствует. [2]

Грипп C отличается от гриппа A и B по своим структурным компонентам. Есть три аминокислоты, которые составляют цитоплазматическую часть HEF, аргинин-треонин-лизин, тогда как при гриппе A и B состоит из десяти аминокислот гемагглютинина. Посттрансляционная модификация HEF - это ацилирование жирными кислотами. Было обнаружено, что жирная кислота, стеариновая кислота, является преобладающей жирной кислотой, присоединенной к HEF, тогда как жирная кислота пальмитиновая кислота обнаруживается во всех других мембранных белках.[9] Из-за частой перегруппировки штаммов он моноподтипичен и стабилен. Это приводит к появлению нового штамма, который помогает вирусу лучше адаптироваться к своему хозяину.[2]

использованная литература

  1. ^ а б c Зенг К., Лангереис М.А., ван Влит А.Л., Хейзинга Э.Г., де Гроот Р.Дж. (июль 2008 г.). «Структура гемагглютинин-эстеразы коронавируса дает представление об эволюции вируса короны и гриппа». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 105 (26): 9065–9. Bibcode:2008PNAS..105.9065Z. Дои:10.1073 / pnas.0800502105. ЧВК  2449365. PMID  18550812.
  2. ^ а б c d е ж г час я j k л м п о п q р s т ты v ш Икс y z аа ab Ван М., Людвиг К., Бёттчер С., Файт М. (май 2016 г.). «Роль стеарата присоединения к гликопротеину слияния гемагглютинин-эстераза HEF вируса гриппа C». Клеточная микробиология. 18 (5): 692–704. Дои:10.1111 / cmi.12541. PMID  26518983.
  3. ^ Ю Дж, Хика Б., Лю Р, Шэн З., Хаус БМ, Ли Ф, Ван Д. (июль 2017 г.). «Гликопротеин слияния гемагглютинин-эстераза является основным фактором, определяющим исключительную термическую и кислотную стабильность вируса гриппа D». мСфера. 2 (4). Дои:10.1128 / мСфера.00254-17. ЧВК  5549178. PMID  28808690.
  4. ^ а б c d Langereis MA, Zeng Q, Gerwig GJ, Frey B, von Itzstein M, Kamerling JP, de Groot RJ, Huizinga EG (сентябрь 2009 г.). «Структурные основы распознавания лигандов и субстратов торовирусными гемагглютининовыми эстеразами». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 106 (37): 15897–902. Bibcode:2009ПНАС..10615897Л. Дои:10.1073 / pnas.0904266106. ЧВК  2747215. PMID  19721004.
  5. ^ Copeland CS, Zimmer KP, Wagner KR, Healey GA, Mellman I., Helenius A (апрель 1988 г.). «Сворачивание, тримеризация и транспорт - последовательные события в биогенезе гемагглютинина вируса гриппа». Ячейка. 53 (2): 197–209. Дои:10.1016/0092-8674(88)90381-9. PMID  3359486.
  6. ^ а б c d Sugahara K, Hongo S, Sugawara K, Li ZN, Tsuchiya E, Muraki Y, Matsuzaki Y, Nakamura K (июнь 2001 г.). «Роль отдельных олигосахаридных цепей в антигенных свойствах, внутриклеточном транспорте и биологической активности белка гемагглютинин-эстеразы вируса гриппа С». Вирусология. 285 (1): 153–64. Дои:10.1006 / viro.2001.0952. PMID  11414815.
  7. ^ Мартин LT, Верхаген А, Варки А (2003). «Рекомбинантная гемагглютинин-эстераза гриппа C в качестве зонда для 9-O-ацетилирования сиаловой кислоты». Методы в энзимологии. 363: 489–98. Дои:10.1016 / S0076-6879 (03) 01074-7. PMID  14579598.
  8. ^ а б Ван М., Людвиг К., Бёттчер С., Файт М. (май 2016 г.). «Роль стеарата присоединения к гликопротеину слияния гемагглютинин-эстераза HEF вируса гриппа C». Клеточная микробиология. 18 (5): 692–704. Дои:10.1111 / cmi.12541. PMID  26518983.
  9. ^ а б Szepanski S, Veit M, Pleschka S, Klenk HD, Schmidt MF, Herrler G (май 1994). «Посттрансляционный фолдинг гликопротеина вируса гриппа С HEF: дефектный процессинг в клетках, экспрессирующих клонированный ген». Журнал общей вирусологии. 75 (5): 1023–30. Дои:10.1099/0022-1317-75-5-1023. PMID  8176364.