N-ацетилглутаматсинтаза - N-Acetylglutamate synthase

N-Ацетилглутаматсинтаза
4kzt.jpg
N-Ацетилглутаматсинтаза / тетрамер киназы, Марикаулис Марис
Идентификаторы
СимволКлячи
Ген NCBI162417
HGNC17996
OMIM608300
RefSeqNM_153006
UniProtQ8N159
Прочие данные
Номер ЕС2.3.1.1
LocusChr. 17 q21.31

N-Ацетилглутаматсинтаза (Клячи) является фермент что катализирует производство N-ацетилглутамат (NAG) из глутамат и ацетил-КоА.

Проще говоря, NAGS катализирует следующую реакцию:

ацетил-КоА + L-глутамат → КоА + N-ацетил-L-глутамат

НАГС, член N-ацетилтрансфераза семейство ферментов, присутствует в обоих прокариоты и эукариоты, хотя его роль и структура сильно различаются в зависимости от вида. NAG можно использовать в производстве орнитин и аргинин, два важных аминокислоты, или как аллостерический кофактор за карбамоилфосфатсинтаза (CPS1). У млекопитающих NAGS экспрессируется в основном в печени и тонком кишечнике и локализуется в митохондриальном матриксе.[1]

Общая схема реакции для N-ацетилглутамат (NAG) синтез через N-ацетилглутаматсинтаза (NAGS)

Биологическая функция

Большинство прокариот (бактерии ) и низшие эукариоты (грибок, зеленые водоросли, растения и т.д.) продуцируют NAG через орнитинацетилтрансферазу (OAT), которая является частью «циклического» пути продукции орнитина. Таким образом, NAGS используется в вспомогательной роли, пополняя резервы NAG по мере необходимости. Однако у некоторых растений и бактерий NAGS катализирует первую стадию «линейного» пути продукции аргинина.[2]

Последовательности белков NAGS между прокариотами, низшими эукариотами и высшими эукариотами показали заметное отсутствие сходства. Идентичность последовательностей между прокариотическими и эукариотическими NAGS в основном составляет <30%,[3] в то время как идентичность последовательностей между низшими и высшими эукариотами составляет ~ 20%.[4]

Ферментативная активность NAGS модулируется L-аргинин, который действует как ингибитор в растительных и бактериальных НАГС, но эффектор в позвоночные.[5][6] Хотя роль аргинина как ингибитора NAG в синтезе орнитина и аргинина хорошо известна, существуют некоторые разногласия относительно роли NAG в цикл мочевины.[7][8] В настоящее время принятая роль NAG у позвоночных - это важный аллостерический кофактор для CPS1, и поэтому он действует как основной контроллер поток через цикл мочевины. В этой роли регулирование обратной связи из аргинина будет действовать, чтобы сигнализировать NAGS, аммиак в клетке много, и его необходимо удалить, что ускоряет функцию НАГС. В настоящее время эволюционный путь NAGS от незаменимого синтетического фермента до регулятора первичного цикла мочевины еще предстоит полностью понять.[9]

Механизм

Упрощенный механизм реакции для N-ацетилглутаматсинтаза (NAGS)

Два механизмы за N-ацетилтрансферазная функция: двухступенчатый механизм пинг-понга, включающий передачу соответствующего ацетильная группа к активированной цистеин остаток[10] и одношаговый механизм через прямую атаку амино- азот на карбонил группа.[11] Исследования, проведенные с использованием NAGS, полученных из Neisseria gonorrhoeae предполагают, что NAGS действует с помощью ранее описанного одношагового механизма.[12] В этом предложении карбонильная группа ацетил-КоА подвергается атаке непосредственно α-аминогруппой глутамата. Этот механизм поддерживается активацией карбонила через водородная связь поляризация, а также отсутствие подходящего цистеина в активном центре, который действовал бы как промежуточный акцептор ацетильной группы.[13][14]

Клиническое значение

Бездействие NAGS приводит к Nдефицит ацетилглутаматсинтазы, форма гипераммониемия.[15] У многих позвоночных N-ацетилглутамат является важным аллостерическим кофактором CPS1, фермента, который катализирует первую стадию цикла мочевины.[16] Без стимуляции NAG CPS1 не может преобразовать аммиак в карбамоилфосфат, что приводит к накоплению токсичного аммиака.[17] Карбамоил глутамат показал себя многообещающим в качестве возможного лечения дефицита NAGS.[15] Предполагается, что это является результатом структурного сходства между NAG и карабамоилглутаматом, что позволяет карбамоилглутамату действовать как эффективный агонист для CPS1.[14]

Рекомендации

  1. ^ Мейер А.Дж., Лоф С., Рамос И.С., Верховен А.Дж. (апрель 1985 г.). «Контроль уреогенеза». Европейский журнал биохимии. 148 (1): 189–96. Дои:10.1111 / j.1432-1033.1985.tb08824.x. PMID  3979393.
  2. ^ Кунин Р., Глансдорф Н., Пьерар А., Сталон В. (сентябрь 1986 г.). «Биосинтез и метаболизм аргинина в бактериях». Микробиологические обзоры. 50 (3): 314–52. Дои:10.1128 / MMBR.50.3.314-352.1986. ЧВК  373073. PMID  3534538.
  3. ^ Ю. Ю., Тернер Г. Е., Вайс Р. Л. (ноябрь 1996 г.). "Ацетилглутаматсинтаза из Neurospora crassa: структура и регуляция выражения ". Молекулярная микробиология. 22 (3): 545–54. Дои:10.1046 / j.1365-2958.1996.1321494.x. PMID  8939437. S2CID  38149253.
  4. ^ Калдович Л., Ах Мью Н., Ши Д., Моризоно Х., Юдкофф М., Тухман М. (2010). "N-Ацетилглутаматсинтаза: структура, функции и дефекты ». Молекулярная генетика и метаболизм. 100 (Приложение 1): S13–9. Дои:10.1016 / j.ymgme.2010.02.018. ЧВК  2876818. PMID  20303810.
  5. ^ Сайбис Дж., Дэвис Р.Х. (июль 1975 г.). "Организация и контроль пути биосинтеза аргинина Нейроспора". Журнал бактериологии. 123 (1): 196–202. Дои:10.1128 / JB.123.1.196-202.1975. ЧВК  235707. PMID  166979.
  6. ^ Сонода Т, Татибана М (август 1983 г.). "Очистка N-ацетил-L-глутаматсинтетаза из митохондрий печени крыс и субстратная и активаторная специфичность фермента ». Журнал биологической химии. 258 (16): 9839–44. PMID  6885773.
  7. ^ Мейер А.Дж., Верховен А.Дж. (октябрь 1984 г.). "N-Ацетилглутамат и синтез мочевины ». Биохимический журнал. 223 (2): 559–60. Дои:10.1042 / bj2230559. ЧВК  1144333. PMID  6497864.
  8. ^ Лунд П., Виггинс Д. (март 1984 г.). "Является N-ацетилглутамат кратковременный регулятор синтеза мочевины? ". Биохимический журнал. 218 (3): 991–4. Дои:10.1042 / bj2180991. ЧВК  1153434. PMID  6721845.
  9. ^ Caldovic L, Tuchman M (июнь 2003 г.). "N-Ацетилглутамат и его меняющаяся роль в процессе эволюции ». Биохимический журнал. 372 (Pt 2): 279–90. Дои:10.1042 / BJ20030002. ЧВК  1223426. PMID  12633501.
  10. ^ Вонг Л.Дж., Вонг СС (сентябрь 1983 г.). «Кинетический механизм реакции, катализируемой ядерной гистонацетилтрансферазой тимуса теленка». Биохимия. 22 (20): 4637–41. Дои:10.1021 / bi00289a004. PMID  6626521.
  11. ^ Дайда Ф, Кляйн, округ Колумбия, Хикман AB (2000). "Связанные с GCN5 N-ацетилтрансферазы: структурный обзор ». Ежегодный обзор биофизики и структуры биомолекул. 29: 81–103. Дои:10.1146 / annurev.biophys.29.1.81. ЧВК  4782277. PMID  10940244.
  12. ^ Ши Д., Сагар В., Джин З., Ю Икс, Калдович Л., Моризоно Х., Аллевелл Н. М., Тучман М. (март 2008 г.). "Кристаллическая структура N-ацетил-L-глутаматсинтаза из Neisseria gonorrhoeae дает представление о механизмах катализа и регулирования ". Журнал биологической химии. 283 (11): 7176–84. Дои:10.1074 / jbc.M707678200. ЧВК  4099063. PMID  18184660.
  13. ^ Мин Л., Джин З., Калдович Л., Моризоно Х., Аллевелл Н.М., Тучман М., Ши Д. (февраль 2009 г.). «Механизм аллостерического ингибирования N-ацетил-L-глутамат-синтаза L-аргинином ». Журнал биологической химии. 284 (8): 4873–80. Дои:10.1074 / jbc.M805348200. ЧВК  2643497. PMID  19095660.
  14. ^ а б Моризоно Х., Калдович Л., Ши Д., Тухман М. (апрель 2004 г.). "Млекопитающее N-ацетилглутаматсинтаза ". Молекулярная генетика и метаболизм. 81 Дополнение 1: S4–11. Дои:10.1016 / j.ymgme.2003.10.017. ЧВК  3031861. PMID  15050968.
  15. ^ а б Калдович Л., Моризоно Х., Панглао М.Г., Ченг С.Ф., Пакман С., Тучман М. (апрель 2003 г.). "Нулевые мутации в Nген -ацетилглутаматсинтазы, связанный с острым неонатальным заболеванием и гипераммониемией ». Генетика человека. 112 (4): 364–8. Дои:10.1007 / s00439-003-0909-5. PMID  12594532. S2CID  27479847.
  16. ^ Маккадден ЧР, Пауэрс-Ли С.Г. (июль 1996 г.). «Требуемый аллостерический эффекторный сайт для N-ацетилглутамат на карбамоилфосфатсинтетазе I ". Журнал биологической химии. 271 (30): 18285–94. Дои:10.1074 / jbc.271.30.18285. PMID  8663466.
  17. ^ Caldovic L, Morizono H, Daikhin Y, Nissim I., McCarter RJ, Yudkoff M, Tuchman M (октябрь 2004 г.). «Восстановление уреагенеза в Nдефицит ацетилглутаматсинтазы N-карбамилглутамат ». Журнал педиатрии. 145 (4): 552–4. Дои:10.1016 / j.jpeds.2004.06.047. PMID  15480384.

внешняя ссылка